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灭菌法
灭菌法——是指用物理或化学方法杀灭全部微生物,包括致病的和非致病的微生物,以及细菌芽孢的过程,从而造成对活的。
即具有增殖能力的微生物(特别是细菌和真菌l勿使存活(无菌状态)的操作。
主要是杀死微生物,也包括用过滤等方法除去菌体的操作。
权威声音
热力灭菌法
利用高温,使微生物细胞内的一切蛋白质变性,酶活性消失,致使细胞死亡。
通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。
①干热灭菌
直接利用火焰将微生物烧死。
不能用火焰灭菌的物品则利用热空气灭菌,将物品放在烘箱中加热到160~170℃,持续90分钟,此法适用于玻璃、金属和木质的器皿。
②湿热灭菌
以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌。
巴氏灭菌法就是湿热灭菌,此法有两种方式,一是低温长时间处理,即在61.7~62.8℃下处理30分钟;二是高温短时间处理,在71.6℃或略高温度下处理15分钟。
以蒸气加压灭菌效果最好,可用常压蒸气灭菌,也可在高压蒸气锅中灭菌,其蒸气温度可达121℃,能将耐热的芽孢在30分钟内全部杀死。
但对某些易被高压破坏的物质,如某些糖或有机含氮化合物,宜在110℃灭菌15~30分钟。
③间歇加热灭菌
连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法。
此法适用于不能耐100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。
一般是在正常大气压下用蒸气灭菌1小时。
灭菌温度不超过100℃。
不致造成糖类等物质的破坏,而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死,从而达到彻底灭菌的目的。
辐射灭菌法
在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。
较常用的有紫外线,其他还有电离辐射。
波长在25000~80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效。
辐射灭菌法仅限于某些材料,因所需设备复杂,难于广泛使用。
渗透压灭菌法
利用高渗透压溶液进行灭菌的方法。
在高浓度的食盐或糖溶液中细胞脱水,不能进行正常的新陈代谢,结果导致微生物的死亡。
化学试剂灭菌法
大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用。
常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇、1%氯化汞水溶液、3%~5%煤酚皂液、各种消毒肥皂液和某些气体(如环氧乙烷)等消毒剂的灭菌。
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